在線期刊《medRxiv》發佈的名為Seroclearance of HBsAg in Chronic Hepatitis B Patients after a Tolerance-Breaking Therapy: GM-CSF, followed by Human HBV Vaccine的文章，詳細展示了相關的研究發現，要點如下：

• 對接受了標準抗病毒治療的慢性乙型肝炎患者，採用粒細胞/單核細胞集落刺激因子（GM-CSF）組合預防性乙肝疫苗的方案，可大幅清除乙肝患者血清中的HBsAg水平，降低病毒載量，甚至可以讓部分患者實現功能性治癒。

• 進一步研究還發現，該免疫療法成功的關鍵在於有效打破了Treg細胞引起的免疫耐受，這為免疫療法的進一步開發奠定了免疫學基礎。

• 這項研究證實，免疫療法可有效清除慢性乙肝患者的血清HBsAg，有望為這一未被滿足的臨床需求提供新的工具。

慢性乙型肝炎之所以難治，一方面是因為乙肝病毒侵入肝細胞內後，其基因組部分雙鏈的鬆弛環狀DNA（rcDNA）進入細胞核，並形成病毒複製的模板共價閉合環狀DNA（cccDNA）， cccDNA與宿主組蛋白和非組蛋白結合形成病毒微染色體，具有高度穩定性。cccDNA半衰期較長，無需新的病毒進入肝細胞即可自我補充，保持一定數量的轉錄模板。

此外，HBV基因組在宿主細胞酶的作用下還可整合至宿主DNA。整合的病毒基因組無法成為病毒複製的模板，但可持續表達HBsAg，是HBeAg陰性患者HBsAg的主要來源。而這也會增加癌變的風險。

圖：乙型肝炎病毒感染週期

另一方面，機體對HBV會產生免疫耐受，使得HBV感染者對於HBV的細胞免疫和體液免疫都處於較低水平，甚至完全缺乏，無法清除病毒和被病毒感染的細胞。

病毒長期在肝臟中存在，會引發長期炎症，造成慢性肝炎，進而引發各種肝臟疾病。

現有用於乙肝治療的抗病毒藥物，以核苷類似物為主，只能抑制細胞核外的病毒複製，並不能徹底清除病毒，無法實現治癒。

由於cccDNA持續穩定存在，很難將病毒的基因組完全清除，實現徹底治癒。不過，如果能將病毒一直控制在靜默狀態，使其不再有新的病毒生產出來，持續檢測不到血清HBsAg和HBV DNA，HBeAg陰轉，使肝臟炎症緩解和肝組織病理學改善，終末期肝病發生率顯著降低，也可使患者免受疾病的困擾，即實現臨床治癒，也叫「功能性治癒」。

因為現階段缺乏可清除cccDNA和整合HBV DNA的藥物，要實現臨床治癒，只有打破免疫耐受狀態使機體產生有效的固有和適應性抗病毒免疫應答，才能真正達到完全控制病毒複製，實現臨床治癒的效果。

為此，艾棣維欣研究團隊發佈的免疫療法數據，展示了針對乙肝表面抗原的免疫療法，可以打破免疫耐受。

團隊在前期動物模型研究中發現，GM-CSF作為佐劑預注射，再進行重組乙肝疫苗接種，可以很大程度上使DC細胞成熟和分化，DC細胞成熟和分化後會行使抗原提呈的功能，進一步激活抗原特異性免疫反應，即機體針對乙肝表面抗原的免疫力不再抑制，開始清除之前被忽略的乙肝病毒。事實也證明了這點，在動物實驗中，這種方法很好的調動了CD8+殺傷性細胞去攻擊乙肝抗原陽性的肝細胞（Cellular & Molecular Immunology (2016) 13 , 849–861）。

在此基礎之上，本項研究招募的慢性乙型肝炎患者隨機分為三組：1、標準抗病毒藥物阿德福韋酯治療組；2、同時聯合IFN-α治療組；3、標準聯合治療並給與GM-CSF和乙肝疫苗的免疫治療組，分組治療並跟蹤隨訪。

結果發現，針對標準抗病毒治療的慢性乙型肝炎患者，多次注射GM-CSF後，進行多次乙肝疫苗接種，可以不同程度地清除血清中乙肝表面抗原，更觀察到了功能性治癒的患者。

如下圖所示，變化HBsAg水平變化最明顯的是免疫治療組，有43.5%的患者HBsAg水平下降了10倍以上，有21.7%下降了超過100倍，更有患者達到了血清清除，實現臨床治癒。

研究人員還進一步探索了其中的機制。

如前面提到的，免疫耐受使得人體免疫系統不能對病毒有效地產生免疫反應，調節性T細胞（Treg）主要參與了HBsAg耐受。

因此，在研究中隨訪了不同治療方案組，HBsAg特異性CD4+FoxP3+Treg細胞的數量變化，發現免疫治療組Treg細胞活性減弱，因此研究檢測了HBV耐受被打破後是否抗原特異性CD4+和CD8+T細胞的活性水平提高了。在免疫治療組，無論是CD4+T細胞還是CD8+T細胞，其IFN-γ反應顯著被激活，說明該療法可以打破Treg介導的免疫耐受。

研究還觀察到，CHB患者對THRIL-GM-vac治療的反應並不盡相同，有些是反應強烈的「應答者」，但也有一些沒有反應，且具有中等基線水平表面抗原的患者更傾向於HBsAg減少或清除，這些都可潛在地作為評估患者是否適用這種療法。

這項研究找到了一種新的功能性治癒慢性乙型肝炎的方法，證實了乙肝免疫療法的可行性。研究還指出了打破免疫耐受的方向，為免疫療法的繼續開發奠定了基礎，也為患者帶來了新的希望。

隨著乙型肝炎疫苗和乙型肝炎免疫球蛋白的母嬰阻斷措施的普及，以及強效抗病毒藥物的應用，HBV感染的防治取得了長足的進步。然而，全世界仍然有2.5億-2.7億慢性HBV感染者，每年約超過65萬人死於HBV相關終末期肝病，包括肝功能衰竭、肝硬化和肝細胞癌（HCC）。在中國，約8600萬人，超過6.1%的人口長期攜帶乙肝病毒（HBV），每年新發肝癌患者人數超過40萬。慢性HBV感染仍是全球重大公共衛生問題，尋找新的能臨床治癒乙肝的療法十分緊迫。

艾棣維欣是一家創新疫苗公司，依託成熟的內部技術平台開發了高價值預防性及治療性疫苗管線，並具備工業化生產能力。艾棣維欣的關鍵在研產品管線包括針對新型冠狀病毒 (SARS-CoV-2)、呼吸道合胞病毒 (RSV)及乙肝病毒 (HBV)引起疾病的潛在首創疫苗，這些疾病均為醫療需求遠未得到滿足的疾病。艾棣維欣也正在開發涉及一系列癌症疫苗，包括病毒相關腫瘤的候選疫苗、基於腫瘤新抗原 (Neo-Antigen) 的治療性疫苗及腫瘤相關抗原 (TAA)的治療性疫苗。