在线期刊《medRxiv》发布的名为Seroclearance of HBsAg in Chronic Hepatitis B Patients after a Tolerance-Breaking Therapy: GM-CSF, followed by Human HBV Vaccine的文章，详细展示了相关的研究发现，要点如下：
 

• 对接受了标准抗病毒治疗的慢性乙型肝炎患者，采用粒细胞/单核细胞集落刺激因子（GM-CSF）组合预防性乙肝疫苗的方案，可大幅清除乙肝患者血清中的HBsAg水平，降低病毒载量，甚至可以让部分患者实现功能性治愈。

• 进一步研究还发现，该免疫疗法成功的关键在于有效打破了Treg细胞引起的免疫耐受，这为免疫疗法的进一步开发奠定了免疫学基础。

• 这项研究证实，免疫疗法可有效清除慢性乙肝患者的血清HBsAg，有望为这一未被满足的临床需求提供新的工具。

慢性乙型肝炎之所以难治，一方面是因为乙肝病毒侵入肝细胞内后，其基因组部分双链的松弛环状DNA（rcDNA）进入细胞核，并形成病毒复制的模板共价闭合环状DNA（cccDNA）， cccDNA与宿主组蛋白和非组蛋白结合形成病毒微染色体，具有高度稳定性。cccDNA半衰期较长，无需新的病毒进入肝细胞即可自我补充，保持一定数量的转录模板。

此外，HBV基因组在宿主细胞酶的作用下还可整合至宿主DNA。整合的病毒基因组无法成为病毒复制的模板，但可持续表达HBsAg，是HBeAg阴性患者HBsAg的主要来源。而这也会增加癌变的风险。

图：乙型肝炎病毒感染周期

另一方面，机体对HBV会产生免疫耐受，使得HBV感染者对于HBV的细胞免疫和体液免疫都处于较低水平，甚至完全缺乏，无法清除病毒和被病毒感染的细胞。

病毒长期在肝脏中存在，会引发长期炎症，造成慢性肝炎，进而引发各种肝脏疾病。

现有用于乙肝治疗的抗病毒药物，以核苷类似物为主，只能抑制细胞核外的病毒复制，并不能彻底清除病毒，无法实现治愈。

由于cccDNA持续稳定存在，很难将病毒的基因组完全清除，实现彻底治愈。不过，如果能将病毒一直控制在静默状态，使其不再有新的病毒生产出来，持续检测不到血清HBsAg和HBV DNA，HBeAg阴转，使肝脏炎症缓解和肝组织病理学改善，终末期肝病发生率显著降低，也可使患者免受疾病的困扰，即实现临床治愈，也叫“功能性治愈”。

因为现阶段缺乏可清除cccDNA和整合HBV DNA的药物，要实现临床治愈，只有打破免疫耐受状态使机体产生有效的固有和适应性抗病毒免疫应答，才能真正达到完全控制病毒复制，实现临床治愈的效果。

为此，艾棣维欣研究团队发布的免疫疗法数据，展示了针对乙肝表面抗原的免疫疗法，可以打破免疫耐受。

团队在前期动物模型研究中发现，GM-CSF作为佐剂预注射，再进行重组乙肝疫苗接种，可以很大程度上使DC细胞成熟和分化，DC细胞成熟和分化后会行使抗原提呈的功能，进一步激活抗原特异性免疫反应，即机体针对乙肝表面抗原的免疫力不再抑制，开始清除之前被忽略的乙肝病毒。事实也证明了这点，在动物实验中，这种方法很好的调动了CD8+杀伤性细胞去攻击乙肝抗原阳性的肝细胞（Cellular & Molecular Immunology (2016) 13 , 849–861）。

在此基础之上，本项研究招募的慢性乙型肝炎患者随机分为三组：1、标准抗病毒药物阿德福韦酯治疗组；2、同时联合IFN-α治疗组；3、标准联合治疗并给与GM-CSF和乙肝疫苗的免疫治疗组，分组治疗并跟踪随访。

结果发现，针对标准抗病毒治疗的慢性乙型肝炎患者，多次注射GM-CSF后，进行多次乙肝疫苗接种，可以不同程度地清除血清中乙肝表面抗原，更观察到了功能性治愈的患者。

如下图所示，变化HBsAg水平变化最明显的是免疫治疗组，有43.5%的患者HBsAg水平下降了10倍以上，有21.7%下降了超过100倍，更有患者达到了血清清除，实现临床治愈。

研究人员还进一步探索了其中的机制。

如前面提到的，免疫耐受使得人体免疫系统不能对病毒有效地产生免疫反应，调节性T细胞（Treg）主要参与了HBsAg耐受。

因此，在研究中随访了不同治疗方案组，HBsAg特异性CD4+FoxP3+Treg细胞的数量变化，发现免疫治疗组Treg细胞活性减弱，因此研究检测了HBV耐受被打破后是否抗原特异性CD4+和CD8+T细胞的活性水平提高了。在免疫治疗组，无论是CD4+T细胞还是CD8+T细胞，其IFN-γ反应显著被激活，说明该疗法可以打破Treg介导的免疫耐受。

研究还观察到，CHB患者对THRIL-GM-vac治疗的反应并不尽相同，有些是反应强烈的“应答者”，但也有一些没有反应，且具有中等基线水平表面抗原的患者更倾向于HBsAg减少或清除，这些都可潜在地作为评估患者是否适用这种疗法。

这项研究找到了一种新的功能性治愈慢性乙型肝炎的方法，证实了乙肝免疫疗法的可行性。研究还指出了打破免疫耐受的方向，为免疫疗法的继续开发奠定了基础，也为患者带来了新的希望。

随着乙型肝炎疫苗和乙型肝炎免疫球蛋白的母婴阻断措施的普及，以及强效抗病毒药物的应用，HBV感染的防治取得了长足的进步。然而，全世界仍然有2.5亿-2.7亿慢性HBV感染者，每年约超过65万人死于HBV相关终末期肝病，包括肝功能衰竭、肝硬化和肝细胞癌（HCC）。在中国，约8600万人，超过6.1%的人口长期携带乙肝病毒（HBV），每年新发肝癌患者人数超过40万。慢性HBV感染仍是全球重大公共卫生问题，寻找新的能临床治愈乙肝的疗法十分紧迫。

艾棣维欣是一家创新疫苗公司，依托成熟的内部技术平台开发了高价值预防性及治疗性疫苗管线，并具备工业化生产能力。艾棣维欣的关键在研产品管线包括针对新型冠状病毒 (SARS-CoV-2)、呼吸道合胞病毒 (RSV)及乙肝病毒 (HBV)引起疾病的潜在首创疫苗，这些疾病均为医疗需求远未得到满足的疾病。艾棣维欣也正在开发涉及一系列癌症疫苗，包括病毒相关肿瘤的候选疫苗、基于肿瘤新抗原 (Neo-Antigen) 的治疗性疫苗及肿瘤相关抗原 (TAA)的治疗性疫苗。